การตรวจเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ เจจูไน จากเนื้อไก่ด้วยวิธี ลูปมีดิเอเตด ไอโซเทอร์มอล แอมพลิฟิเคชันแบบวัดค่าสีในอำเภอเมือง จังหวัดจันทบุรี
คำสำคัญ:
แคมไพโลแบคเตอร์, ลูปเมดิเอเตด ไอโซเทอร์มอล แอมพลิฟิเคชัน, แบบวัดค่าสีบทคัดย่อ
การศึกษางานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ เจจูไน ด้วยเทคนิคลูปมีดิเอเตด ไอโซเทอร์มอล แอมพลิฟิเคชัน (แลมป์) แบบวัดค่าสี เปรียบเทียบกับวิธีมาตรฐาน โดยเก็บตัวอย่างเนื้อไก่จากตลาดสดในอำเภอเมือง จังหวัดจันทบุรี ประเทศไทย จำนวน 30 ตัวอย่าง พบว่า ในตัวอย่างเนื้อไก่ 13 ตัวอย่าง มีการปนเปื้อนเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ เจจูไน และตัวอย่าง
เนื้อไก่ 17 ตัวอย่าง ไม่พบการปนเปื้อนเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ เจจูไน จากการตรวจสอบค่าความไวของปริมาณดีเอ็นเอของเชื้อ พบว่า ให้ผลการตรวจวิเคราะห์ได้ต่ำสุดที่ 364 เฟมโตกรัมต่อไมโครลิตร จากการตรวจสอบค่าความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียชนิดอื่นที่นำมาทดสอบ พบว่า มีความจำเพาะต่อดีเอ็นเอของเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ โดยไพรเมอร์ที่ใช้ในการทดสอบไม่จับกับเชื้อแบคทีเรียก่อโรคในระบบทางเดินอาหารชนิดอื่น จากการเปรียบเทียบวิธีการเพาะเลี้ยงเชื้อในห้องปฏิบัติการกับวิธีการตรวจวิเคราะห์ดีเอ็นเอของเชื้อด้วยเทคนิคลูปมีดิเอเตด ไอโซเทอร์มอล แอมพลิฟิเคชันแบบวัดค่าสี พบว่า ทั้ง 2 วิธี มีค่าความไว ความจำเพาะและความแม่นยำ เท่ากับ 100 เปอร์เซ็นต์ ชุดทดสอบที่ได้รับการพัฒนาจึงสามารถใช้งานได้ง่าย สะดวก รวดเร็ว และแม่นยำในการตรวจวิเคราะห์เชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ เจจูไน ได้ดีกว่า นอกจากนี้ยังสามารถใช้ตรวจสอบเชื้อในภาคสนามได้ ทั้งนี้เพื่อเป็นแนวทางในการเฝ้าระวังเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ในผลิตภัณฑ์สัตว์ปีก
References
Frirdich, E., Biboy, J., Huynh, S., Parker, C.T., Vollmer, W., & Gaynor, E.C. (2017). Morphology heterogeneity within a Campylobacter jejuni helical population: the use of calcofluor white to generate rod-shaped C. jejuni 81-176 clones and the genetic determinants responsible for differences in morphology within 11168 strains. Mol Microbiol, 104(6), 948-971.
Hajihosseini, S., Nasirizadeh, N., Hejazi, M.S., & Yaghmaei, P. (2016). A sensitive DNA biosensor fabricated from gold nanoparticles and graphene oxide on a glassy carbon electrode. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl, 61, 506-515.
Hiroshi Ushijima, S.N., Thongprachum, A., Shimizu-Onda, Y., Tran, D.N., Pham, N.T.K., Takanashi, S., Dey, S.K., Okitsu S., Yamazaki, W., Mizuguchi, M., & Hayakawa, S. (2014). Sensitive and rapid detection of campylobacter species from stools of children with diarrhea in Japan by the loop-mediated isothermal amplification method. Japanese Journal of Infectious Diseases, 67(5), 374–378.
Kaakoush, N.O., Castano-Rodriguez, N., Mitchell, H.M., & Man, S.M. (2015). Global Epidemiology of Campylobacter Infection. Clin Microbiol Rev, 28(3), 687-720.
Kaygusuz, D., Vural, S., Aytekin, A.O., Lucas, S.J., & Elitas, M. (2019). DaimonDNA: A portable, low-cost loop-mediated isothermal amplification platform for naked-eye detection of genetically modified organisms in resource-limited settings. Biosens Bioelectron, 141, 111409.
Lawson, A.J., Logan, J.M., O'Neill G.L., Desai, M., & Stanley, J. (1999). Large-scale survey of Campylobacter species in human gastroenteritis by PCR and PCR-enzyme-linked immunosorbent assay. J Clin Microbiol, 37(12), 3860-3864.
Mohran, Z.S., Arthur, R.R., Oyofo, B.A., Peruski, L.F., Wasfy, M.O., Ismail, T.F., & Murphy, J.R. (1998). Differentiation of Campylobacter isolates on the basis of sensitivity to boiling in water as measured by PCR-detectable DNA. Appl Environ Microbiol, 64(1), 363-365.
Pham, N.T., Trinh, Q.D., Khamrin, P., Ukarapol, N., Kongsricharoern, T., Yamazaki, W., Komine-Aizawa, S., Okitsu, S., Maneekarn, N., Hayakawa, S., & Ushijima, H. (2015). Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) for Detection of Campylobacter jejuni and C. coli in Thai Children with Diarrhea. Jpn J Infect Dis, 68(5), 432-433.
Quyen, T.L., Nordentoft, S., Vinayaka, A.C., Ngo, T.A., Engelsmenn, P., Sun, Y., Madsen, M., Bang, D.D., & Wolff, A. (2019). A Sensitive, Specific and Simple Loop Mediated Isothermal Amplification Method for Rapid Detection of Campylobacter spp. in Broiler Production. Front Microbiol, 10, 2443.
Romero, M.R., D'Agostino, M., Arias, A.P., Robles, S., Casado, C.F., Iturbe, L.O., Lerma, O.G., Andreou, M., & Cook, N. (2016). An immunomagnetic separation/loop-mediated isothermal amplification method for rapid direct detection of thermotolerant Campylobacter spp. during poultry production. J Appl Microbiol, 120(2), 469-477.
Sabike, II., Uemura, R., Kirino, Y., Mekata, H., Sekiguchi, S., Okabayashi, T., Goto Y., & Yamazaki, W. (2016). Use of Direct LAMP Screening of Broiler Fecal Samples for Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in the Positive Flock Identification Strategy. Front Microbiol, 7, 1582.
Silva, J., Leite, D., Fernandes, M., Mena, C., Gibbs, P.A., & Teixeira, P. (2011). Campylobacter spp. as a Foodborne Pathogen: A Review. Front Microbiol, 2, 200.
Szczepanska, B., Andrzejewska, M., Spica, D., & Klawe, J.J. (2017). Prevalence and antimicrobial resistance of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli isolated from children and environmental sources in urban and suburban areas. BMC Microbiol, 17(1), 80.
Xie, L., Xie, Z., Zhao, G., Liu, J., Pang, Y., Deng, X., Xie, Z., Fan, Q., & Luo, S. (2014). A loop-mediated isothermal amplification assay for the visual detection of duck circovirus. Virol J, 11, 76.
Yamazaki, W. (2013). Sensitive and rapid detection of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli using loop-mediated isothermal amplification. Methods Mol Biol, 943, 267-277.
Yamazaki, W., Taguchi, M., Kawai, T., Kawatsu, K., Sakata, J., Inoue, K., & Misawa, N. (2009). Comparison of loop-mediated isothermal amplification assay and conventional culture methods for detection of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in naturally contaminated chicken meat samples. Appl Environ Microbiol, 75(6), 1597-1603.
Downloads
เผยแพร่แล้ว
How to Cite
ฉบับ
บท
License
กองบรรณาธิการขอสงวนสิทธิ์ในการปรับปรุงแก้ไขตัวอักษรและคำสะกดต่างๆ ที่ไม่ถูกต้อง และต้นฉบับที่ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร PSRU Journal of Science and Technology ถือเป็นกรรมสิทธิ์ของคณะวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี มหาวิทยาลัยราชภัฏพิบูลสงคราม และ
ผลการพิจารณาคัดเลือกบทความตีพิมพ์ในวารสารให้ถือมติของกองบรรณาธิการเป็นที่สิ้นสุด
0-5526-7000 Ext. 4100
