การคัดเลือกยีสต์จากทะเลและป่าชายเลนที่มีประสิทธิภาพในการผลิตเอนไซม์ไลเปส

บทคัดย่อ

งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อแยกยีสต์ที่มีประสิทธิภาพสูงในการผลิตเอนไซม์ไลเปสโดยใช้แหล่งคาร์บอนชนิดต่างๆ เป็นซับสเตรท นํายีสต์ 73 สายพันธุ์ที่แยกได้จากป่าชายเลน น้ำทะเล และตะกอนทะเลด้วยวิธี enrichment มาคัดเลือกการผลิตเอนไซม์ไลเปสบนอาหารแข็งที่มีไตรบูไทรินและทวีน 80 เป็นองค์ประกอบด้วยวิธี plate assay ผลการทดลองพบว่ามียีสต์ 60 สายพันธุ์ที่แสดงบริเวณใสบนอาหารแข็งไตรบูไทริน และ 10 สายพันธุ์ที่แสดงบริเวณขุ่นบนอาหารแข็งทวีน 80 โดยสายพันธุ์ SPA4-2 มีค่าประสิทธภิาพของเอนไซม์ (enzyme activity index, EAI) สูงสุด เท่ากับ 3.38 บนอาหารแข็งไตรบูไทริน ขณะที่สายพันธุ์ BP12 มีค่า EAI สูงสุดเท่ากับ 2.16 บนอาหารแข็งทวีน 80 จากการศึกษากิจกรรมเอนไซม์ไลเปสของยีสต์สายพันธุ์ SPA4-2 และ BP12 ในอาหารเหลวที่มีแหล่งคาร์บอนชนิดต่างๆ ได้แก่ ไตรบูไทริน ทวีน 80 น้ำมันปาล์ม และน้ำมันใช้แล้วเป็นแหล่งคาร์บอนที่มีความเข้มข้นเริ่มต้นเท่ากับ 20 กรัมต่อลิตร ผลการทดลองพบว่าสายพันธุ์ SPA4-2 และ BP12 มีกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสสูงสุดในอาหารที่มีน้ำมันปาล์มเป็นแหล่งคาร์บอน โดยมีกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสที่เวลาเพาะเลี้ยง 120 ชั่วโมง เท่ากับ 1.53±0.11 และ 0.75±0.06 units/mL ตามลําดับ ยีสต์สายพันธุ์ SPA4-2 ที่ผลิตเอนไซม์ไลเปสได้สูงสุดถูกจัดจําแนกเป็น Cryptococcus liquefaciens ซึ่งมีความเหมือนกับ C. liquefaciens CBS 968^T (AF181515) 99.83 เปอร์เซ็นต์จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าสายพันธุ์ SPA4-2 มีความเหมาะสมต่อการผลิตเอนไซม์ไลเปสและจะเป็นประโยชน์ต่อการนําไปใช้ในระดับอุตสาหกรรมต่อไปในอนาคต