การพัฒนาชุดตรวจ Indirect ELISA เพื่อตรวจแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัส Porcine Epidemic Diarrhea ในตัวอย่างนมน้ำเหลืองสุกร

บทคัดย่อ

ชุดตรวจ Indirect ELISA PEDV KU1 ได้พัฒนาขึ้นเพื่อใช้ตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสพีอีดีวีในสุกร จากตัวอย่างนมน้ำเหลืองของแม่สุกร โดยเตรียมแอนติเจนจากเชื้อไวรัสสายพันธุ์ TRUNG 1/38 ที่แยกได้จากการระบาดในประเทศไทย จากการทดสอบด้วยวิธี checker board titration ของแอนติเจนจากเชื้อที่เตรียมได้กับแอนติบอดีมาตรฐานที่ให้ผลบวกทั้งส่วนที่จําเพาะต่ออิมมูโนโกลบุลิน จี (IgG) และอิมมูโนโกลบุลิน เอ (IgA) จะสามารถเคลือบแอนติเจนได้อัตราส่วนเท่ากับ 1:320 และอัตราส่วนการเจือจางแอนติบอดีที่อัตราส่วน 1:40 เมื่อนํามาทดสอบเพื่อหาจุดตัด (cut off point) ของชุดตรวจที่พัฒนาขึ้น โดยใช้ตัวอย่างนมน้ำเหลืองของแม่สุกรจากฟาร์มปลอดเชื้อ (PEDV negative farm) จํานวน 100 ตัวอย่าง และตัวอย่างจากฟาร์มที่ผ่านการได้รับเชื้ออยู่ในฝูง 2-3 สัปดาห์ (Positive farm) จํานวน 100 ตัวอย่าง (n=200) พบว่าทั้งแอนติบอดีส่วนที่จําเพาะต่อ IgG และ IgA จะได้ค่าเท่ากัน คือ ที่จุดตัด ของ S/P ratio = 0.4 และเมื่อนําชุดตรวจมาประเมินเปรียบเทียบกับวิธี IFA พบว่า การทดสอบแอนติบอดีส่วนที่จําเพาะต่อ IgG จะได้ค่าความไว เท่ากับ 90.56 เปอร์เซนต์ ค่าความจําเพาะ เท่ากับ 100 เปอร์เซนต์ และค่าการยอมรับทางสถิติ เท่ากับ 0.905 ส่วนแอนติบอดีจําเพาะต่อ IgA จะได้ค่าความไว เท่ากับ 87.96 เปอร์เซนต์ ค่าความจําเพาะ เท่ากับ 100 เปอร์เซนต์ และค่าการยอมรับทางสถิติ เท่ากับ 0.879 ว่า ดังนั้น วิธี Indirect ELISA จากชุดตรวจ PED KU1 จึงสามารถนํามาใช้แทนวิธี IFA ได้ จึงเป็นทางเลือกหนึ่งในการนํามาใช้ประเมินสถานการณ์ การควบคุมโรคในระดับฝูงได้