การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ และการส่งถ่ายยีน gus เข้าสู่ใบอ่อนของแวววิเชียร

บทคัดย่อ

วัตถุประสงค์ของงานวิจัยศึกษาการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อและการส่งถ่ายยีน gus เข้าสู่แวววิเชียรการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อใบอ่อนแวววิเชียรในสภาพปลอดเชื้อบนสูตร อาหาร MS ที่เติม TDZ และ IAA ความเข้มข้น 0-0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร พบว่า เกิดยอดมากที่สุด 38.21 ยอดต่อชิ้นส่วนพืช บนสูตรอาหาร MS ที่เติม TDZ ความ เข้มข้น 0.3 มิลลิกรัมต่อลิตร และ IAA ความเข้มข้น 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร ขณะที่ยอดที่เพาะเลี้ยงบนสูตรอาหาร MS ที่เติม IAA ความเข้มข้น 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร มีการเจริญของรากทุกยอดและมีค่าเฉลี่ยจํานวนรากมากที่สุด 5.3 รากต่อยอด ส่วนการศึกษาอิทธิพลของสารปฏิชีวนะต่อการเจริญเติบโตของใบอ่อนแวววิเชียร เป็นเวลา 6 สัปดาห์ พบว่า ความเข้มข้น 250 มิลลิกรัมต่อลิตร เป็นความเข้มข้นที่สูงที่สุดของ cefotaxime ในอาหารที่ใบอ่อนแวววิเชียรสามารถเจริญและสร้างยอดได้ ไม่แตกต่างจากการทดลองชุดควบคุม ขณะที่ kanamycin ความเข้มข้น 25 มิลลิกรัมต่อลิตร สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของใบอ่อนแวววิเชียร การทดลองการส่งถ่ายยีน gus เข้าสู่ใบอ่อนแวววิเชียร โดยใช้ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ LBA4404 (pSTART) พบว่าการเขย่าใบอ่อนแวววิเชียรร่วมกับ Agrobacterium นาน 20 นาทีให้ประสิทธิภาพในการส่งถ่ายยีนสูงที่สุด คือ 32.30 เปอร์เซ็นต์ และสามารถตรวจสอบยืนยันการแสดงออกของยีน gus ได้โดยวิธี gus assay