การศึกษาลายพิมพ์ดืเอ็นเอของสุกร โดยใช้เทคนิคอาร์เอพืดื-พืรึ}อาร์ DNA Fingerprint Study of Pigs Using RAPD-PCR Technique

Abstract

บทัดย่อ

ผลการศึกษาลายพิมพ์ดีเอ็นเอของสุกร จำนวน 4 สายพันธุ ได้แก่ สุกรพันธุลาเจไวท์ พันธุแลนเรซ พันธุดูร็อค-เจอร์ดู่ และพันธุเหมยซาน ใช้ตัวอย่างสุกรจากศูนย์วิจัยและ!เกอบรมภูสิงห์ มหาวิทยาลัย เทคโนโลยราชมงคลอีสาน วิทยาเขตกาฬสินธุ ทำการสกัดดีเอ็นเอจากตัวอย่างเลือดของสุกร วัดค่า

การตดกลืนแสง 0D มีค่า 1.67, 1.76, 1.50 และ 1.53 ตามลำดับ ทำการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอโดยใช้เทคนิคอาร์เอพิดี-พีดูอาร์โดยสุ่มใช้ primer oligo 101 (5' to 3' sequence GCG CCT GGA G) และ แยกขนาดดีเอ็นเอโดยวิธีอะกาโรสเจลอีเล็คโตรโฟริดูส (agarose gel electrophoresis) โดยใช้ อะกาโรสความเข้มข้น 1.5 เปอร์เซ็นต์(พ/V) เจลขนาด 12x12x15 เซนติเมตรใช้ความต่างศักย์คงที่ 100 โวลต์ นาน 30 นาที ย้อมดีเอ็นเอด้วยเอทธีเดียมโบรมายด์ นาน 5 นาที ล้างออกด้วยนํ้านาน 10 นาที แล้วทำการตรวจสอบลายพิมพ์ดีเอ็นเอด้วยเครื่อง UV-Transilluminator เพิ่อทำการวิเคราะห์ผล เปรียบเทียบกับ lamda hind marker และ 100 base pair marker พบว่าสุกรพันธุลาร์จไวท์มีลายพิมพ์ ดีเอ็นเอขนาด 90 bp สกรพันธุแลนเรซมีลายพิมพ์ดีเอ็นเอขนาด 2,000 bp สกรพันธุดร็อค-เจอร์ดู่

มีลายพิมพ์ดีเอ็นเอ ขนาด 70 bp และสุกรพันธุเหมยซานมีลายพิมพ์ดีเอ็นเอขนาด 450 bp ตามลำดับ จากผลการศึกษาลายพิมพ์ดีเอ็นเอของสุกรสามารถนำไปใช้เป็นข้อมูลเบื้องต้นสำหรับการศึกษา ความหลากหลายทางพันธุกรรมดู่งใช้เป็นประโยชน่ในการพัฒนาและปรับปรุงพันธุสุกรต่อไป

คำสำคัญ: สุกรพันธุลาร์จไวท์; สุกรพันธุแลนเรซ; สุกรพันธุดูร็อค-เจอร์ดู่; สุกรพันธุเหมยซาน ลายพิมพ์ดีเอ็นเอ; เทคนิคอาร์เอพิดี-พิดูอาร์

Abstract

DNA fingerprint studys of 4 species of pigs from the Research and Training Phusing Center, Rajamangala University of Technology Isan, Kalasin Campus: 1) Large white; 2) Landrace; 3) Duroc-Jersey; and 4) Meishan were used. DNA were extracted from blood and absorbed 1.67, 1.76,1.50 and 1.53, respectively. DNA samples obtained from RAPD-PCR technique with primer oligo 101 (5' to 3' sequence GCG CCT GGA G) were isolated 1.5 percent (พ/V) agarose gel electrophoresis, 100 volt for 30 mins. Gels were stained with ethidium bromide for 5 mills, rinsed for 10 mins. DNA fragments were determined by UV-Transilluminator, photographed and compared with lamda hind marker and 100 base pair marker. In this research, DNA patterns were 90 bp of Large white, 2,000 bp of Landrace, 70 bp of Duroc-Jersey and 450 bp of Meishan, respectively. For our results, DNA patterns were used to study preliminary genetic diversity for improving and developing each pig species.

Keywords: Large white;  Landrace; Duroc-Jersey; Pigs; Meishan; DNA fingerprint; RAPD-PCR